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糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测

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周大炜, 刘斌, 吴俊丽, 胡波, 齐源远. 2011: 糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测, 质谱学报, 32(4): 193-199.
引用本文: 周大炜, 刘斌, 吴俊丽, 胡波, 齐源远. 2011: 糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测, 质谱学报, 32(4): 193-199.
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ZHOU Da-wei, LIU Bin, WU Jun-li, HU Bo, QI Yuan-yuan. 2011: Monitoring of Glycosyltransferase Reactions by MALDI-TOF Mass Spectrometry, Journal of Chinese Mass Spectrometry Society, 32(4): 193-199.
Citation: ZHOU Da-wei, LIU Bin, WU Jun-li, HU Bo, QI Yuan-yuan. 2011: Monitoring of Glycosyltransferase Reactions by MALDI-TOF Mass Spectrometry, Journal of Chinese Mass Spectrometry Society, 32(4): 193-199.
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糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测

  • 南开大学泰达生物技术学院,天津300457;天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津300457;南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室,天津300457

  • 南开大学泰达生物技术学院,天津,300457

Monitoring of Glycosyltransferase Reactions by MALDI-TOF Mass Spectrometry

  • 摘要: 以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和ωfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法.该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测.研究结果表明,CIDMALDI-TOFMS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势.
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出版历程
  • 刊出日期:  2011-08-28

糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测

  • 南开大学泰达生物技术学院,天津300457;天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津300457;南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室,天津300457
  • 南开大学泰达生物技术学院,天津,300457

摘要: 以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和ωfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法.该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测.研究结果表明,CIDMALDI-TOFMS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势.

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